Las incubadoras de dióxido de carbono (CO 2 ) son indispensables para el trabajo de biología. Proporcionan niveles de CO2, humedad y temperatura bien regulados que son ideales para el cultivo de células y tejidos. Sin embargo, es probable que estas condiciones que son óptimas para sus células y tejidos promuevan el crecimiento de microorganismos contaminantes como hongos, bacterias, micoplasmas y virus.
Cuando ocurre la contaminación biológica, puede afectar negativamente el progreso de la investigación. Por ejemplo, algunos sistemas celulares como los organoides tardan semanas, si no meses, en crecer, y la contaminación se traduce en una gran pérdida de productividad. Por otro lado, la contaminación por micoplasma no suele notarse en la etapa inicial y no se detecta hasta que los datos experimentales muestran anomalías y deben descartarse. En general, la contaminación interrumpe el progreso científico , reduce la confiabilidad de los datos científicos y debe minimizarse, si no prevenirse.
En un informe de 2010, se encontró contaminación biológica en cerca del nueve por ciento de los cultivos celulares en la industria biofarmacéutica. Las estadísticas fueron aún más alarmantes en los laboratorios académicos , ya que, según se informa, el 80 % de los laboratorios en Japón y el 65 % de los laboratorios en Argentina experimentaron contaminación por micoplasma. Debido a la prevalencia de la contaminación biológica, se han desarrollado una variedad de medidas de control para mantenerlos a raya. Aquí, compartimos algunos de estos consejos que hemos clasificado ampliamente en ingeniería y controles de usuario.
Controles de ingeniería
Para minimizar la contaminación biológica, los fabricantes han introducido una serie de soluciones de ingeniería.
En primer lugar, todas las incubadoras pueden equiparse con filtros de aire de partículas de alta eficiencia (HEPA), en el interior o el exterior, que pueden eliminar partículas del aire exterior con diámetros superiores a 0,3 μm con una eficiencia superior al 99,95 % antes de hacer fluir el aire filtrado. a las incubadoras. Tenga en cuenta que debido a que el micoplasma tiene entre 0,1 y 0,3 μm, los filtros HEPA no pueden filtrarlo y, por lo tanto, se necesitan otros controles de ingeniería. Además, los filtros HEPA deben reemplazarse cada seis meses, ya que pueden obstruirse con partículas grandes que reducen su eficacia de filtrado.
Luego, las incubadoras más nuevas están equipadas con funciones automatizadas de descontaminación y esterilización por calor que brindan limpieza con el uso de calor y vapor. Sin embargo, se recomienda una inspección anual para garantizar que esta función se mantenga correctamente. Desafortunadamente, los diseños más antiguos de incubadoras generalmente no vienen con un sistema de esterilización automatizado; por lo tanto, la limpieza manual de rutina debe realizarse semanalmente.
Finalmente, se han incorporado varios diseños ingeniosos a las incubadoras para minimizar la contaminación biológica y los usuarios deben tratar de utilizarlos. Por ejemplo, con la incorporación de esquinas redondeadas, los usuarios pueden identificar y limpiar fácilmente los derrames. El cobre también es el material de elección para las incubadoras, incluidas las rejillas y la bandeja de agua, debido a sus propiedades antimicrobianas. Algunas incubadoras más nuevas incluso vienen con esterilización ultravioleta (UV). Por lo general, de 15 a 30 minutos de tratamiento UV serán suficientes para la descontaminación, pero los usuarios deben tener en cuenta que esto solo funciona en superficies que están en contacto con los rayos UV, y las células deben retirarse de las incubadoras antes de la esterilización UV.
Controles de usuario
Los investigadores albergan un rico ecosistema de microorganismos y son la fuente más probable de contaminación. Sin embargo, siguiendo buenas prácticas, los investigadores pueden minimizar en gran medida el riesgo de introducir contaminantes biológicos en las incubadoras.
Primero, las incubadoras deben colocarse lo más lejos posible de los contaminantes. En general, se recomienda colocar las incubadoras sobre el suelo para que los microorganismos cerca del piso y en los zapatos de los usuarios no entren en la incubadora durante la apertura y el cierre. Las incubadoras también deben colocarse más alejadas de las áreas del laboratorio con mucho tráfico humano, ya que el aire en movimiento puede introducir contaminantes sin querer. Colocar las incubadoras lejos de la luz solar directa ayuda a evitar la condensación inducida por la temperatura dentro de las incubadoras que los microorganismos pueden aprovechar para crecer.
En segundo lugar, el personal de laboratorio debe practicar buenos protocolos al trabajar con incubadoras. Nunca deben tocar el interior de una incubadora con guantes sin esterilizar o mangas sueltas ni hablar en una incubadora. Cualquier artículo que se coloque dentro de las incubadoras debe esterilizarse con etanol al 70 por ciento y limpiarse a fondo. También es importante mantener la frecuencia de apertura de la puerta al mínimo: antes de abrir una incubadora, los usuarios deben rociar el costado de la puerta y sus guantes con etanol al 70 por ciento para esterilizar las superficies que pueden estar contaminadas con microorganismos. Es importante destacar que los usuarios también deben tener cuidado de no sobrellenar una incubadora con demasiados matraces de cultivo celular y placas de pocillos, ya que esto puede interrumpir el flujo de aire adecuado y la uniformidad de la temperatura. Cuando ocurre una diferencia de temperatura, puede ocurrir condensación dentro de las incubadoras,
Finalmente, las incubadoras deben limpiarse semanalmente, ya que esto ayuda a eliminar los posibles contaminantes antes de que se vuelvan más graves. Para limpiar el interior de la incubadora de manera efectiva, los elementos de la incubadora primero deben trasladarse a otra incubadora, libre de contaminantes. Luego, con el uso de desinfectante de amonio cuaternario al dos por ciento seguido de etanol al 70 por ciento, la incubadora puede descontaminarse adecuadamente. Contrariamente a las prácticas populares, los fabricantes desaconsejan el uso de lejía como desinfectante, ya que puede corroer los metales de las incubadoras. El proceso de descontaminación se completa después de encender la calefacción para secar el interior de la incubadora. Durante la limpieza, también se debe cambiar el agua de la bandeja que ayuda a mantener la humedad de la incubadora, y solo se debe usar agua destilada estéril. Se debe evitar el agua del grifo, ya que a menudo contiene bacterias, y se debe evitar el agua desionizada, ya que puede corroer las bandejas de metal. En general, también se agregan productos químicos como desinfectante de amonio cuaternario a la bandeja de agua para evitar el crecimiento de microorganismos.
Las incubadoras de CO2 han transformado en gran medida la forma en que realizamos experimentos biológicos. No basta solo con procurar la incubadora perfecta para su laboratorio. Al proporcionar un entorno bien regulado, facilitan el crecimiento óptimo de células y tejidos, y son un elemento básico en muchos laboratorios de biología. Existen múltiples fuentes de contaminación biológica, incluido el entorno del laboratorio (aire y tierra) y los usuarios, pero con controles efectivos de ingeniería y de usuario, es posible mantener a raya a los contaminantes para generar datos científicos fiables y reproducibles.
Fuente: Lab Manager
