La electroforesis es un proceso electrocinético que separa partículas cargadas en un fluido utilizando un campo de carga eléctrica. Se utiliza con mayor frecuencia en las ciencias de la vida para separar moléculas de proteínas o ADN y se puede lograr a través de varios procedimientos diferentes según el tipo y el tamaño de las moléculas. Los procedimientos difieren en algunos aspectos, pero todos necesitan una fuente de carga eléctrica, un medio de apoyo y una solución buffer. La electroforesis se utiliza en laboratorios para la separación de moléculas en función del tamaño, la densidad y la pureza.
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Cómo funciona la electroforesis
Se aplica un campo eléctrico a las moléculas y, como ellas mismas están cargadas eléctricamente, se produce una fuerza que actúa sobre ellas. Cuanto mayor sea la carga de la molécula, mayor será la fuerza aplicada por el campo eléctrico y, por lo tanto, más a través del medio de soporte se moverá la molécula en relación con su masa.
Algunos ejemplos de aplicaciones de la electroforesis incluyen el análisis de ADN y ARN, así como la electroforesis de proteínas, que es un procedimiento médico utilizado para analizar y separar las moléculas que se encuentran en una muestra de líquido (más comúnmente, muestras de sangre y orina).
Tipos de electroforesis
Por lo general, se utilizan diferentes tipos de geles como medio de soporte para la electroforesis y esto puede estar en forma de placa o tubo, según cuál sea más beneficioso. Las losas de gel permiten analizar muchas muestras simultáneamente y, por lo tanto, se utilizan con frecuencia en los laboratorios. Sin embargo, los geles de tubo brindan una mejor resolución de los resultados, por lo que, a menudo, se eligen para la electroforesis de proteínas.
El gel de agarosa se usa comúnmente para la electroforesis de ADN. Tiene una estructura de poros grandes que permite que las moléculas más grandes se muevan con facilidad, pero no es adecuada para secuenciar moléculas más pequeñas.
La electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE, por sus siglas en inglés) tiene una resolución más clara que el gel de agarosa, lo que la hace más adecuada para el análisis cuantitativo. Esto hace posible identificar cómo las proteínas se unen al ADN. También se puede utilizar para desarrollar la comprensión de cómo las bacterias se vuelven resistentes a los antibióticos a través del análisis de plásmidos.
La electroforesis 2D separa las moléculas a lo largo de un eje X y un eje Y, uno separándolas por carga y el otro por tamaño.
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Fuente: Cleaver Scientific. What is electrophoresis?
