Agar Sabouraud Dextrosa (Al 4%)

Cultive y diferencie los hongos con el agar dextrosa Sabouraud Oxoid, una modificación del agar Sabouraud (Carlier). El medio suele utilizarse con antibióticos para el aislamiento de hongos patógenos de los materiales que contienen grandes cantidades de otros hongos o bacterias.

Georg et al. añadieron de forma aséptica 0,5 g de cicloheximida, 20 000 unidades de penicilina y 40 000 unidades de estreptomicina a cada litro de medio refrigerado en autoclave. Cryptococcus neoformans,Aspergillus fumigatus y Allescheria boydii son sensibles a la cicloheximida; Actinomyces bovis y Nocardia asteroides son sensibles a la penicilina y la estreptomicina. Alternativamente, se puede añadir 0,4 g de cloranfenicol y 0,05 g de cicloheximida a cada litro de medio reconstituido antes de la esterilización en autoclave (Ajello). Los mismos microorganismos son sensibles a esta nueva combinación (consulte el Suplemento selectivo para Dermasel SR0075E).

Williams Smith y Jones emplearon agar dextrosa Sabouraud Oxoid, con 20 000 unidades de penicilina y 0,04 g de penicilina por litro, para el recuento de levaduras y mohos del tracto gastrointestinal del cerdo. Hantschke utilizó colistina, novobiocina y cicloheximida para aislar Candida albicans. Dolan utilizó gentamicina, cloranfenicol y cicloheximida para el aislamiento selectivo de hongos patógenos.

El agar dextrosa Sabouraud Oxoid también pueden utilizarse como la base de un medio Pagano-Levinpara el aislamiento de Candida albicans. Se añade 0,1 g de trifeniltetrazolio cloruro (como solución esterilizada filtrada) a cada litro de medio fundido esterilizado en autoclave y refrigerado a 55 °C. El medio suele hacerse inhibidor a la mayoría de los hongos y bacterias no patógenos mediante la adición de antibióticos, como anteriormente. Tras la incubación durante tres días a 25 °C, las colonias de Candida albicans aparecen despigmentadas o de color rosa pálido mientras que otras especies de Candida y otros hongos forman colonias de color rosa o rojo más profundo. La prueba es suficiente para el cribado, pero también se pueden utilizar otros criterios de diagnóstico para la identificación de Candida albicans

La combinación de cicloheximida y cloranfenicol inhibe muchos hongos patógenos. Sin embargo, la fase micelial de Histoplasma capsulatum,Paracoccidioides brasiliensis,Sporothrix schoenckii y Blastomyces dermatitidis no se inhibe por medio de estos antibióticos cuando se incuba a 25 - 30 °C .

Revise la documentación de salud y seguridad pertinente antes de trabajar con ciclohexamida. Algunos de los hongos patógenos pueden producir esporas infecciosas que se dispersan fácilmente en el laboratorio. Esos organismos deben examinarse únicamente dentro de una cabina de protección.